聚丙烯酰胺凝膠電泳(英語: polyacrylamide gel electrophoresis,簡稱PAGE) ,是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)的一種常用電泳技術(shù),用于分離蛋白質(zhì)和寡核苷酸。
作用原理:聚丙烯酰胺凝膠為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),具有分子篩效應(yīng)。它有兩種形式:非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native-PAGE)和變性聚丙烯酰胺凝膠。
在蛋白質(zhì)的非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳中,蛋白質(zhì)能夠保持完整狀態(tài),并依據(jù)蛋白質(zhì)的分子量大小、蛋白質(zhì)的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開;在DNA的非變性 聚丙烯酰胺凝膠電泳中,DNA呈雙鏈狀態(tài)泳動,其遷移率會受堿基組成和序列的影響。
在變性聚丙烯酰胺凝膠電泳中,由于加入了變性劑——蛋白質(zhì)變性劑常為SDS(SDS-PAGE),核酸變性劑常為尿素、甲酰胺等,故其分離僅依據(jù)于分子量大小。蛋白質(zhì)的SDS-PAGE技術(shù)最初由shapiro于1967年建立,他們發(fā)現(xiàn)在樣品介質(zhì)和丙烯酰胺凝膠中加入離子去污劑和強還原劑(SDS即十二烷基硫酸鈉)后,蛋白質(zhì)亞基的電泳遷移率主要取決于亞基分子量的大?。梢院雎噪姾梢蛩兀?。