用聚丙烯酰胺為支持基質的電泳程序。一般說來,實現聚丙烯酰胺凝膠電泳有兩種類型。
⑴單向電泳:采用完整的蛋白質或用十二烷基硫酸鈉(SDS)處理的蛋白質的單向泳動,在有凝膠的平板上平行分離(過去也有用在玻管中的圓筒形棒狀凝膠進行電泳的,現已很少有人使用)。
⑵雙向電泳:首先用天然蛋白質進行分離,然后凝膠平板再用SDS處理,樣品便在第二向得到分離。第一次分離了各種各樣的蛋白質,因此第二向分離的是蛋白質亞基。
主要優(yōu)點是:
⑴合成聚合物,故重復性良好;
⑵分離能力好;
⑶通過增減丙烯酰胺單體和交聯劑(N,N′-亞甲基雙丙烯酰胺)的濃度,可以調節(jié)凝膠的孔徑大小;
⑷操作簡便、時間短;
⑸化學性質穩(wěn)定、機械性能好,柔軟;
⑹在酸性或堿性緩沖液中均可進行電泳,而且可加入兩性電解質進行等電點電泳,可用含電解質表面活性劑(SDS)或非電解質表面活性劑(Np40、Tritonx-100等)的凝膠進行電泳,亦可使兩者組合進行雙向電泳等等,使用范圍廣泛,利用價值日益提高;
⑺由于染色技術的進步,可以進行定量,也可檢測出極微量的斑點(瓊脂糖電泳)。